基因治疗行业报告（32页）

2017 年 Kymriah、Yescarta 接连被 FDA 批准上市，开启了 CAR-T 治疗元年。CAR-T 细胞开创性地将可识别 TAA（肿瘤相关抗原）的单链可变区（scFv）通过铰链区 与 TCR-CD3 复合物中的 CD3ζ信号转导区域结合（第二代、第三代在此基础上还 结合了一个或多个共刺激信号域）。因此 CAR-T 细胞可以绕过通过肿瘤表面 MHC 类分子递呈的抗原、直接识别肿瘤表面特异性抗原而被激活，从而克服了肿瘤细 胞通过下调 MHC 类分子表达而造成的免疫逃逸作用。通过改造 scFv 区域，可以 使 CAR-T 细胞靶向不同的 TAA，目前已上市的三款 CAR-T 产品均靶向 CD19 分子， 此外，BCMA、CD22、CD30 等也是备受关注的抗原靶点。尽管 CAR-T 疗法在血液瘤领域表现出了优秀的临床获益，但是它仍然存在许多短 板，例如对于实体瘤效果不佳、生产成本高、生产速度慢、引发细胞因子风暴等。 因此，对于替代或补充疗法（如 TCR-T、CAR-NK、CAR-巨噬细胞等）的研究也在 如火如荼地进行中，相信过继性免疫细胞疗法在 CAR-T 之后还会持续带给我们更 多惊喜。

通过 DNA 重组技术将治疗基因重组到质粒中，并将包含治疗基因的质粒转染到 病毒载体中（目前已上市三款产品使用慢病毒或 AAV 载体），纯化后的病毒悬浮 液注射到患者体内后病毒感染患者细胞，在胞内表达患者自身缺失基因的功能性 拷贝，并产生相应功能性蛋白，从而达到治疗目的。因此该方法只适用于致病原 因是缺乏某种基因的功能性拷贝，长期安全性还有待验证。经典的 ASOs 通常是由化学合成的、长度在 12-30nt 的寡核苷酸单链。由于单链 RNA 稳定性较差，因此 ASOs 中以反义 DNA 药物为主。反义 DNA 通过碱基互补配 对原则与目标 mRNA 结合形成 RNA-DNA 异源双链，从而阻遏其翻译或招募 RNase  H1 降解目标 mRNA。 （2）miRNA 和 siRNA miRNA 和 siRNA 均为双链 RNA(dsRNA)，主要是通过 RNAi（RNA 干扰）机制发挥作 用。RNAi 是指由 20-30nt 的 sncRNA 结合到目标 mRNA 上使其降解或者翻译受阻从 而在翻译水平上抑制目标基因的表达。 具体过程为：dsRNA(double stranded RNA)或 shRNA(short hairpin RNA)在 Dicer 核酸内 切酶作用下被剪切成为 21-25nt 的 siRNA 双链或 22nt 的 miRNA 双链，随之与 AGO 蛋白结合形成 RNA 诱导沉默复合体(RISC)，正义链被释放或降解，仅含反义链的 RISC 被激活，通过碱基互补配对原则与目标 mRNA 结合，将其剪切或抑制其翻译。